Malmin terveydenhuoltoalue, laboratorio-ohjekirja

4490 __-TbNhO

__- Mycobacterium tuberculosis, nukleiinihappo (kval)

Tekopaikka

Turun Y-Lab/(02) 333 7420.

Lähete

Turun Y-Lab/Bakteriologisten tutkimusten lähete. Lähetteeseen toivotaan merkintää värjäystuloksesta, mikäli se on tiedossa.

Yleistä

Potilaalle on pyydettävä aina myös 2812 -TbVi (Mycobacterium tuberculosis, viljely) tai 4437-TbEVi (Mycobacterium, erikoisviljely), koska herkkyysmääritystä varten tarvitaan viljelty mikrobi.

Viljely ja värjäys ovat edelleen tuberkuloosidiagnostiikan kulmakiviä. Nopeutensa vuoksi nukleiinihappojen monistukseen perustuvat menetelmät sopivat täydentäviksi tutkimuksiksi. Ne soveltuvat

erityisesti käytettäviksi värjäys positiivisissa hengitystienäytteissä

erottelemaan M. tuberculosis muista mykobakteereista.

Värjäys negatiivisissa hengitystienäytteissä, joissa basillia on selvästi vähemmän, monistusmenetelmien herkkyys viljelyyn verrattuna on

vaihdellut eri tutkimuksissa välillä 57-100%.

Ekstrapulmonaarisen tuberkuloosin kliininen kuva voi olla hyvin vaihteleva (tuberkuloottinenpleuriitti, luu- ja niveltuberkuloosi, munuaistuberkuloosi, tuberkuloottinen meningiitti, ihotuberkuloosi, tuberkuloottiset abskessit ja fistelit) ja diagnostiikka vaikeaa. Viljely ja värjäys ovat edelleen perusmenetelmiä. Nukleiinihappojen monistukseen perustuvaa M. tuberculosiksen osoitusta voidaan käyttää viljelyn lisänä. Koska ekstrapulmonaarisissa näytteissä basillien lukumäärä on usein vähäinen ja lopulliseen analyysiin tuleva näytetilavuus pieni (100 μl), näiden menetelmien herkkyys on viljelyyn verrattuna usein vaatimaton (tutkimuksesta ja materiaalista riippuen 30-90%).

Indikaatiot

Tuberkuloosiepäily.

Menetelmä

Mycobacterium tuberculosis LCX (Abbott Diagnostics) monistaa proteiini antigeeni b:tä koodaavaa geeniä, joka esiintyy vain M. tuberculosis -kompleksin lajeilla (M. tuberculosis, M. bovis, M. bovis BCG, M. microtii ja M. africanum). Menetelmä on rekisteröity värjäyspositiivisten yskösnäytteiden tutkimiseen. Menetelmän analyyttinen herkkys on noin 50 cfu/reaktio.

Tekotiheys

Näytemääristä riippuen 1-2 kertaa viikossa. Tulos on valmiina tekopäivänä.

Positiiviset näytteet uusitaan seuraavassa ajossa. Positiiviset tulokset ilmoitetaan puhelimitse.

Tulos valmiina

Tulos on valmiina viikon kuluttua näytteen saapumisesta tutkivaan laboratorioon.

Tärkeää

Muista potilaan eristys jo näytteenottovaiheessa.

Näyte (minimi)

Respiratoriset näytteet:

Yskös: 2-5 ml spontaanisti yskittyä tai stimuloitua aamuysköstä ysköskupissa. Mykobakteerien epäsäännöllisen erittymisen vuoksi suositellaan 2-4 eri päivinä otetun näytteen tutkimista.

Bronkus- tai trakea-imunäyte, mahalimanäyte (lapsilta): 1-10 ml steriilissä putkessa.

BAL-neste: 10-50 ml steriilissä putkessa.

Ekstrapulmonaariset näytteet:

Pleuraneste, nivelneste 10-50 ml EDTA- tai sitraattiputkessa

Selkäydinneste 1-10 ml steriilissä putkessa

Virtsa 50 ml steriilissä putkessa

Märkänäyte sellaisenaan steriilissä putkessa

Koepala, halkaisija vähintään 3 mm steriilissä putkessa, ei formaliinia (Huom! Ottokohta merkittävä lähetteeseen).

Detektiorajan (50 cfu/reaktio) saavuttamiseksi toivotaan mahdollisimman suuren näytemäärän lähettämistä.

Verisissä näytteissä (luuydin, endometrium) on usein inhibitorisia tekijöitä, jotka vaikeuttavat testin luotettavaa suorittamista.

Näytteen säilytys

3 vrk jääkaapissa +5 ºC.

Näytteen lähetys

Ma - to kylmälähetyksenä.

Viitearvot

Negatiivinen

Tulkinta

Positiivinen tulos viittaa siihen, että näytteessä on M. tuberculosis-kompleksiin kuuluvan bakteerin DNA:ta. DNA:n löytyminen kudospalasta ei kuitenkaan välttämättä merkitse aktiivista tuberkuloosia. Negatiivinen LCX-tulos värjäys-positiivisesta näytteestä viittaa atyyppisiin mykobakteereihin. Muuten negatiivinen tulos ei poissulje tuberkuloosia. Vuonna -98 LCX:n herkkyys ekstrapulmonaarinäytteissä viljelyyn verrattuna oli laboratoriossamme 76.5% ja spesifisyys 96.5%.